La fonction du condenseur est de concentrer la lumière sur l’objet. Les microscopes d'initiation sont le plus souvent dépourvus de condenseur, auquel est substitué un miroir. Le champ éclairé par le condenseur doit être uniforme. La position adéquate du condenseur doit être la plus proche possible de la lame.

Chaque condenseur est constitué d'un diaphragme. Le rôle de ce diaphragme est de sélectionner les rayons lumineux qui vont passer au centre de la lentille collectrice. L’iris du condensateur n’est pas utilisé pour ajuster la luminosité. On se sert du rhéostat de la lampe pour cet ajustement. La fermeture de l’iris augmente la profondeur de champ et le contraste mais diminue la résolution et la luminosité. Un iris trop fermé peut aussi donner des images fantômes.

   Ajustement de l’iris du condenseur   
La position idéale de l’iris du condenseur est lorsqu’il est ouvert de 70 à 80% de l’ouverture numérique de l’objectif. Cet ajustement se fait en retirant l’oculaire et en regardant par le tube le diamètre du champ qui est éclairé.

   Le centrage du condenseur    
Cette opération se fait en cinq étapes:
- Enlever le filtre diffuseur du chemin optique.
- Placer une lame sur le microscope et faire la mise au point.
- Fermer complètement l’iris de champ.
- Centrer à l’aide des vis de centrage.
- Replacer le filtre diffuseur.

   Ajustement de l’éclairage de Kohler.   
La zone éclairée par le diaphragme de champ doit correspondre au champ observé. Une zone éclairée plus grande que le champ observé provoque une diminution du contraste.

Cette opération se fait en plusieurs étapes:
- Enlever le filtre diffuseur du chemin optique.
- Placer une lame sur le microscope et faire la mise au point.
- Fermer complètement l’iris de champ.
- Descendre ou monter le condensateur pour que l'image de l'hexagone soit nette
- Centrer si nécessaire à l’aide des vis de centrage.
- Ouvrir le diaphragme de champ pour que les sommets du polygone touchent à la
  limite du champ.
- Replacer le filtre diffuseur.